1 器材

　　1.1 药材

　　旋覆花（Inula japonica Thub.）购于北京同仁堂药材公司，产地河北省。

　　1.2 试剂鞣酸（AR，北京化学试剂公司），干酪素（Sigma公司），基准氧化锌（北京益利精细化学有限公司）。铬黑T（北京市旭东化工厂 ），EDTA-2Na（ 北京欣经科生物技术有限公司），Folin试剂（钨酸钠 50 g，加入85％磷酸40 ml和蒸馏水375 ml，混合，加热回流3 h，冷后加水稀释至500 ml，避光保存。），0.1 mol/L醋酸－醋酸钠缓冲液（pH =5.0），其他试剂均为分析纯。

　　1.3 仪器紫外可见分光光度计（上海尤尼柯公司，型号2802PC）， 电子 天平（十万分之一，赛多利斯，BP211D ） 。

　　2 方法

　　2.1 旋覆花水提物的制备旋覆花花序1 kg，加入95%乙醇8 L室温浸泡48 h。过滤，残渣再重复操作1次。醇提后的残渣挥干乙醇后，用10 L蒸馏水室温浸泡24 h。过滤，残渣再用水重复操作1次。合并水提液，50℃减压浓缩，浓缩液冷冻干燥获得水提物。

　　2.2 干酪素法［8］

　　2.2.1 标准曲线的绘制精确称取鞣酸（真空干燥至恒重）43.84 mg置于200 ml容量瓶中，加入30%甲醇水溶液定容，摇匀，得到溶液I。精密吸取溶液I1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 ml分别置于 10 ml容量瓶中，分别用30%甲醇补齐至5 ml。然后再加入0.1 mol/L醋酸－醋酸钠缓冲液（pH=5.0）至刻度，摇匀。精密吸取5个不同浓度标准溶液 1 ml分别置于10 ml容量瓶中，加入Folin试剂0.5 ml，再加入2%NaCO3溶液至刻度，混匀。显色后于720 nm处测定吸光度，以蒸馏水作空白对照。 计算 回归方程。

　　2.2.2 样品鞣质的含量测定精确称取样品145.01 mg于50 ml容量瓶中，加蒸馏水溶解并定容。精密吸取样品溶液2 ml于25 ml棕色容量瓶中，加入0.1 mol/L醋酸－醋酸钠缓冲液（pH=5.0）10 ml，再加30%甲醇定容，得到溶液II。精密吸取II溶液10 ml置于已盛有干酪素500 mg的50 ml棕色容量瓶中，振荡1 h，过滤，得溶液III。分别吸取II和III溶液1 ml，置于10 ml棕色容量瓶中，各加入Folin试剂0.5 ml，再加2%NaCO3溶液至刻度，摇匀。室温放置12 min后，以蒸馏水作空白对照，在波长720 nm处测定吸光度，为A1和A2。由两吸光度之差（ΔA）代入回归方程，计算活性鞣质的含量。

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